Gereç ve Yöntem: Laboratuarımıza 2014-2020 yılları arasında gelen, invaziv meme karsinomu tanısı almış 90 olgu değerlendirildi. İHK olarak siklin D1 çalışıldı ve morfolojik olarak TIL değerlendirildi.

Bulgular: Siklin D1 overekspresyonu ile histolojik alt tip, tümör çapı, lenfovasküler invazyon, metastatik lenf nodu sayısı, ekstrakapsüler infiltras-yon, HER2 durumu, Ki-67 ekspresyonu, T ve N evresi arasında istatistiksel olarak anlamlı bir ilişki bulunmadı. Histolojik derece ve nükleer derece ile siklin D1 overekspresyonu arasında negatif korelasyon izlendi. Siklin D1 ekspresyonu yüksek bulunan hastalarda histolojik ve nükleer derece daha düşük bulundu. ER ve PR ekspresyonu ile siklin D1 overekspresyonu arasında istatistiksel olarak anlamlı bir ilişki tespit edildi. Luminal gruplar istatistiksel olarak anlamlı bir şekilde daha fazla siklin D1 ekspresyonu gösterdi. TIL skoru yüksek olgularda anlamlı bir şekilde histolojik ve nükleer derece yüksekti.

Sonuç: Siklin D1 overekspresyonu ve TIL skoru bilinen bazı iyi prognostik faktörler ile ilişkilidir. Bu da siklin D1 overekspresyonunun ve TIL skorunun iyi prognostik bir parametre olarak değerinin olduğunu düşündürmektedir.

Tanı anında metastatik olan, neoadjuvan tedavi alan ve tanı sonrası ilk bir ayda vefat eden olgular ile daha az oranda görülen memenin diğer epitelyal ve mezenkimal tümörleri ve pN evrelemesi yapılmayan olgular çalış-madan çıkarılarak toplamda 90 olgu çalışmaya dahil edildi. Olguların yaş, patolojik evre, histolojik derece, nükleer derece, lenfovasküler invazyon ile östrojen reseptörü (ER), progesteron reseptörü (PR) ve HER2 ekspresyon durumu verileri patoloji raporlarından elde edilmiştir. Olguların H&E boyalı tümör preparatları arşivden çıkartılarak yeniden değerlendirildi ve en uygun preparata ait parafin blok seçildi. Elde edilen kesitlerden siklin D1 çalışılmıştır. Parafin bloklardan 4 μm kalınlığında alınan kesitler Poly-L-Lysine ile kaplı lamlara alındı. Bu dokular siklin D1 (Mouse monoclo-nal, klon SP4-R, kullanıma hazır, 60 dk inkübasyon, Ventana, USA) boyandı. Siklin D1 için pozitif kontrol dokusu olarak tümöre komşu alanlardaki normal meme dokusu kullanıldı. Siklin D1 nükleer boyanması pozitif olarak kabul edildi. Pozitif tümör hücresi yüzdesi se-mikantitatif olarak değerlendirildi. İmmunohistokimya-sal (İHK) skor, 0-yok (pozitif hücre yok), 1-zayıf ( pozitif hücreler <%10), 2-orta (%10-50) ve 3-güçlü (pozitif hücreler >%50) olarak tümör hücresi pozitif boyanma yüzdesine göre sınıflandırıldı (12). Buna göre %50 ve üzeri boyanma Siklin D1’in overekspresyonu olarak kabul edildi. Ki-67 proliferasyon indeksi için İHK preperatları tekrar değerlendirildi. Pozitif tümör hücresi yüzdesi semikantitatif olarak değerlendirildi. Tümör hücrelerinin %14 ve daha azı nükleer pozitif ise düşük Ki-67 proliferasyon indeksi, %15 ve üstü ise yüksek Ki-67 proliferasyon indeksi olarak sınıflandırıldı¹³.

HER-2 ekspresyon durumu için İHK preparatları yeniden College of American Pathologist 2020 protokolüne göre değerlendirildi. Boyanma olmayan veya tümör hücrelerinin ≤%10 zayıf yoğunlukta inkomplet boyanan olgular skor 0, <%10 zayıf inkomplet membranöz boyananlar skor 1, >%10 zayıf-orta yoğunlukta komplet membranöz boyanma ya da ≤%10 şiddetli yoğunlukta komplet membranöz boyanma skor 2, >%10 yoğun şiddette komplet membranöz boyanma skor 3 olarak sınıflandırıldı. Skor 0 ve 1 olan olgular Her-2 negatif, skor 3 olanlar ise pozitif olarak kabul edildi. Her-2 skor 2 olan olgularda ise floresan in situ hibridizasyon (FISH) analiz sonuçlarına göre pozitif veya negatif olarak değerlendirildi.

2014 Uluslararası TIL Çalışma Grubunun yayınladığı kılavuz baz alınarak TIL açısından değerlendirilme yapıldı. İki farklı lokalizasyonda değerlendirilir: stro-mal TIL (sTIL) ve intratumoral TIL (iTIL). İntratumo-ral TIL, tümör hücreleriyle doğrudan etkileşim halin-deki mononükleer hücrelerin yoğunluğunu temsil eder-ken, sTIL, tümör stroması içinde mononükleer hücrele-rin (lenfosit ve plazma hücreleri) kapladığı alanın yüzdesidir.Skorlama, tümör invazyonunun sınırları içeri-sinde yapılır. Normal lobüller, atipik hiperplazi ve inflamatuar yanıtı, nekrozu ve yoğun hiyalinizasyonu çevreleyen duktal karsinom in situ ile ezilme artefaktı değerlendirmeden hariç tutulur.20X lensle (Olympus, BX-51, oküler 22 mm, alan boyutu 0,950 mm2). Buna göre, %0-5 sTIL yoğunluğuna sahip hastalar %5 olarak gruplandırıldı; sonraki değerler %10 ve katları olarak puanlandı. ITILWG'ye göre; %0-10 skor alan hastalar düşük; %20-40 skor alan hastalar orta; %50 ve üzeri skor alan hastalar ise yüksek sTIL olarak gruplandırıldı⁹. H&E boyalı preparatlar ışık mikroskobunda incelendi. Seçilen lam üzerinde stromal lenfositlerin, tümör stromasının ne kadarlık bir alanını kapladığı, TIL yüzdesi olarak verildi. İnvaziv tümör dışı alanlarda ve DKIS alanları etrafında lenfositler değerlendirmeye alınmadı. Ayrıca nekroz alanları, ezilme artefakt alanları ve regresyona bağlı hiyalinizasyon alanları da değerlendirme dışı tutuldu.

İstatistiksel Analiz
Araştırmada gerekli en düşük veri sayısının hesaplanması için G*Power 3.1.9.7 yazılımı kullanılarak güç analizi yapılmıştır. Buna göre dört grupta tanımlana Siklin D1 değişkeni ile yapılacak en büyük ki-kare analizi göz önüne alınarak serbestlik derecesi 9 kabul edilmiştir ve 0,5 etki büyüklüğü, α =0,05 ve %90 güç ile en düşük örnek sayısı 80 olarak hesaplanmıştır.

Araştırmanın verileri SPSS 29 yazılımı ile analiz edilmiştir. Siklin D seviyelerine ait gruplar ile klinikopatolojik parametreler arasındaki ilişkiler ki-kare testi ile değerlendirilmiştir. Beklenen değerlerin yeterli olma-masından dolayı ki-kare testinin yapılamadığı durum-larda likelihood ratio’lar kullanılmıştır. Shapiro Wilk testi ile TIL değerinin dağılım özellikleri değerlendi-rilmiş ve normal dağılıma uymadığından TIL değeri ortalamalarının klinikopatolojik parametreler arasında-ki farkları Mann Whitney-U testi ve Kruskal Wallis testleri ile değerlendirilmiştir. Kategorik veriler sayı ve yüzde değerleri ile, sayısal veriler ortalama ve standart sapma değerleri ile sunulmuştur. Analizlerde anlamlılık düzeyi p <0,05 kabul edilmiştir.

Büyütmek İçin Tıklayın

Resim 1: Tümörü infiltre eden lenfositler %0 (H&Ex20).

Büyütmek İçin Tıklayın

Resim 2: Tümörü infiltre eden lenfositler %50 (H&Ex20).

Bu parametreler ve olguların diğer prognostik paramet-releri tablo 1’de gösterilmiştir.

Büyütmek İçin Tıklayın

Tablo 1: Siklin D1 ekspresyon gruplarının klinokopatolojik parametreler ile karşılaştırılması.

Siklin D1 ekspresyonu, overekspresyonu grupları ile hasta yaşı arasında anlamlı bir ilişki bulunmamıştır (p >0.05). Siklin D1 overekspresyonu, ekspresyon grupları ile tümör çapı, tümör adedi ve tümörü infiltre eden lenfosit oranı arasında anlamlı ilişki saptanma-mıştır (p >0.05). Metastatik lenf nodu bulunan olgula-rın %90.1’inde, metastaz rastlanmayan olguların %97.8’inde siklin D1 overekspresyonu izlenmiştir. Aksiller lenf nodu varlığı ile siklin D1 overekspresyo-nu arasında istatistiksel anlamlı bir fark bulunmamıştır (p >0.05). Metastatik aksiller lenf nodu sayısı ile siklin D1 overekspresyon grupları arasında anlamlı ilişki görülmüştür. Yapılan post hoc testlerinde ekspresyon saptanmayan gruptaki metastatik aksiller lenf nodu sayısı, %10-50 ekspresyon gösteren grubun lenf nodu sayısından anlamlı olarak yüksek olduğu saptanmıştır (p <0.05). Histolojik ve nükleer derece sınıflaması ile siklin D1 overekspresyonu arasındaki ilişki incelendiğinde, histolojik ve nükleer derece ile siklin D1 overekspresyonu arasında ters korelasyon saptanmıştır (p <0.05). Yetmiş adet invaziv meme karsinomu NST tanısı almış olgunun 65’i (%92.9), 20 adet invaziv lobüler karsinom olgusunun tamamı (%100) siklin D1 overekspresyonu göstermiştir. Siklin D1 boyanması izlenmeyen 5 olgu da invaziv karsinom NST tanısı almıştır (Resim 3, 4).

Büyütmek İçin Tıklayın

Resim 3: Siklin D1 ekspresyon kaybı (x20).

Büyütmek İçin Tıklayın

Resim 4: Güçlü siklin D1 ekspresyonu (x10).

Histolojik alt tipler ile siklin D1 overekspresyonu ara-sında istatistiksel anlamlı bir fark bulunmamıştır (p >0.05). Olguların 44 tanesinde (%48.9) lenfovaskü-ler invazyon mevcuttu. Lenfovasküler invazyonu olan olguların 40 tanesinde (%90.1) siklin D1 overekspres-yonu göstermiştir. Bu olgulardan 7 tanesi (%15.9) <%10 zayıf, 19 tanesi (%43.2) ise >%50 güçlü siklin D1 ekspresyonu göstermiştir. Lenfovasküler invazyon ile siklin D1 overeskpresyonu arasında anlamlı bir ilişki saptanmamıştır (p >0.05). Kırk beş olguda (%50) lenf nodu metastazı izlenmiştir. Aksiller lenf nodu metastazı olan olguların 30 tanesinde (%66.6) ekstra-kapsüler infiltrasyon mevcuttur. Ekstrakapsüler infiltrasyonu olan olguların 27’sinde (%90) siklin D1 ove-rekspresyonu varken 3 tanesinde (%10) ekspresyon kaybı izlenmiştir. Ekstrakapsüler infiltrasyonu ile siklin D1 overekspresyonu arasında anlamlı bir ilişki saptanmamıştır (p >0.05).

HER-2 pozitif olgu sayısı 19’dur (%21.1). HER-2 pozitif olguların 1 tanesi (%5.3) siklin D1 ekspresyon kaybı, 18 tanesi (% 94.7) ise siklin D1 ekspresyonu göstermiştir. HER-2 durumu ile siklin D1 overekspresyonu arasında anlamlı bir ilişki saptanmamıştır (p >0.05). Ki-67 proliferasyon indeksi ile siklin D1 overekspresyonu arasında anlamlı bir ilişki saptanmamıştır (p >0.05). ER durumu ile siklin D1 overekspresyonu ve ekspresyon grupları arasında istatistiksel olarak anlamlı bir ilişki bulunmuştur. ER pozitif olgularda siklin D1 boyanma oranları daha fazla saptanmıştır (p <0.05). PR durumu ile siklin D1 overekspesyonu arasında aynı şekilde bir korelasyon mevcuttur (p <0.05). Moleküler alt tipler ile siklin D1 overekspresyonu arasında ilişki incelendiğinde, luminal gruplarda an-lamlı şekilde daha fazla siklin D1 overekspresyonu saptanmıştır (p <0.05). Triple negatif grupta anlamlı bir şekilde siklin D1 overekspresyonu izlenmemiştir. Hormon durumu incelendiğinde 78 olgu (%86.6) hormon pozitif, 12 olgu (%13.4) ise hormon negatiftir. Hormon durumu ile siklin D1 overekspresyonu arasında istatistiksel olarak anlamlı bir ilişki saptanmıştır (p <0.05). Hormon pozitif vakalarda daha fazla siklin D1 overekspresyonu saptanmıştır. Olgular T evrelerine göre incelendiğinde 36 olgu (%40) T1, 49 olgu (%54.4) T2, 5 olgu (%5.6) T3 evesindedir. T evresi ile siklin D1 overekspresyonu arasında anlamlı bir ilişki saptanmamıştır (p >0.05). Moleküler alt tipler ile siklin D1 overekspresyonu arasında ilişki incelendiğinde, luminal gruplarda anlamlı şekilde daha fazla siklin D1 overekspresyonu saptanmıştır (p <0.05). Triple negatif grupta anlamlı bir şekilde siklin D1 overekspresyonu izlenmemiştir. Olgular N evrelerine göre incelendiğin-de 45 olgu (%50) N0, 26 olgu (%28.9) N1, 15 olgu (%16.7) N2, 4 olgu (%4.4) N3 evresindedir. N evresi ile siklin D1 overekspresyonu karşılaştırılması arasında anlamlı bir ilişki saptanmamıştır (p >0.05).Olguların TIL yüzdesi ile yaş, tümör odak sayısı, tümör çapı ve metastatik aksiller lenf nodu sayısı arasındaki ilişki incelendiğinde istatistiksel olarak anlamlı bir ilişki saptanmamıştır (p >0.05)

Histolojik derece ile TIL yüzdesi arasında istatistiksel olarak anlamlı bir fark saptanmıştır (p <0.05). Bu ilişki incelendiğinde histolojik derece arttıkça TIL yüzdesi-nin de arttığı görülmüştür (r =0.26). Nükleer derece ile TIL yüzdesi arasında arasında istatistiksel olarak an-lamlı bir fark olup derece arttıkça TIL yüzdesinin arttı-ğı saptanmıştır (p <0.05, r =0.24).

Lenfovasküler invazyonu olan olgularda TIL ortalama-sı 19.32 iken invazyon olmayan olgularda 19.57’dir. Lenfovasküler invazyon ile TIL yüzdesi arasında anlamlı bir ilişki saptanmamıştır (p >0.05). Ekstrakapsüler infiltrasyonu olan olguların TIL ortalaması %17.33 olup ikisi arasında istatistiksel olarak anlamlı bir ilişki saptanmamıştır (p >0.05). PR durumu ile TIL ilişkisi incelendiğinde PR negatif olguların TIL ortalaması 32.11, PR pozitif olguların ortalaması 16.06’dır. PR negatif olgularda TIL ortalaması anlamlı bir şekilde yüksek saptanmıştır (p <0.05). ER ve HER-2 durumu ile TIL ilişkisi incelediğinde ise her ikisiyle de anlamlı ilişki saptanmamıştır (p >0.05).

Ki-67 proliferasyon indeksi yüksek olan olguların ortalama TIL değeri %21.96, düşük olan grubun ortalama TIL değeri ise %16.82 olup TIL ve Ki-67 arasında anlamlı bir ilişki saptanmamıştır (p >0.05). Moleküler alt tipler ile TIL arasındaki ilişki incelendiğinde, %30 ile TIL ortalaması en yüksek grup triple negatif grup olmuştur. Moleküler alt tip ile TIL arasında istatistiksel olarak anlamlı bir ilişki saptanmamıştır (p >0.05). Olgular T ve N evrelerine göre incelendiğinde TIL ile aralarında anlamlı bir ilişki saptanmamıştır (p >0.05). Olguların TIL yüzdesi ile yaş, tümör odak sayısı, tümör çapı ve metastatik aksiller lenf nodu sayısı arasındaki ilişki incelendiğinde istatistiksel olarak anlamlı bir ilişki saptanmamıştır (p >0.05). Bu parametreler ve olguların diğer prognostik parametreleri tablo 2’de gösterilmiştir.

Büyütmek İçin Tıklayın

Tablo 2: Klinikopatolojik parametrelerin ortalama TIL değerleri.

Meme kanserinde siklin D1 overekspresyonunun prog-nostik ve prediktif değeri tartışmalıdır. Meme karsi-nomlarında siklin D1 overekspresyonu farklı birçok çalışmaya konu olmuştur. Parvin T. ve arkadaşlarının¹¹. 50 hastada yaptığı çalışmada siklin D1 ekspresyonu, 14 vakada (%28) güçlü pozitif, 16 vakada (%32) orta ve 20 vakada (%40) negatif/zayıf izlenmiştir. Bilalovic N. ve arkadaşlarının¹⁷ 48 meme karsinomlu hastada yaptığı çalışmada hastaların 13’ünde (%27) zayıf, 21’inde (%44) orta ve 14’ünde (%29) güçlü siklin D1 ekspresyonu saptanmıştır. Guo L. ve arkadaşlarının¹⁸ çalışmasında vakaların %52’sinde (51/98) siklin D1 pozitif bulunmuştur. Ortiz A. ve arkadaşlarının¹³ 2017 yılında yaptığı 179 vakalık bir çalışmada 94 vakada (%52) güçlü pozitif, 52 vakada (%29) orta, 21 vakada (%12) zayıf ve 12 vakada (%7) negatif izlenmiştir. Guo L. ve arkadaşlarının¹⁹ 2015 yılında yaptığı farklı bir çalışmaya 226 vaka dahil edilmiş olup 174 vaka siklin D1 ekspresyonu göstermiştir. Bizim çalışmamızda 5 vaka (%6) negatif, 14 vaka zayıf (%15.6), 31 vaka orta şiddette (%34.4), 40 vaka (%44.4) güçlü siklin D1 ekspresyonu göstermektedir. Toplam siklin D1 ekspresyonu gösteren vaka oranımız %94’tür. Bu oran %52-93 arasında değişen literatür ile karşılaştırıldığında yüksektir. Bu sonucun, siklin D1 ekspresyon değerlendirilmesinde kullanılan sınır değerlerin farklı kabul edilmesinden kaynaklandığı düşünülmüştür.

Literatürde yer alan bir çok çalışmada yaş, histolojik tip, tümör boyutu, tümör adedi, ile siklin D1 overekspresyonu arasında anlamlı bir ilişki bulunmamıştır^11,13,19,20. Bizim çalışmamızda da bu parametreler ile siklin D1 overekspresyonu arasındaki ilişki literatür ile uyumlu olarak saptanmıştır. Ancak tümör boyutu ile ilgili literatürde faklı sonuçlar tespit edilen çalışmalar da mevcuttur. Bilalovic N. ve arkadaşlarının¹⁷ 48 vakadan oluşan çalışmasında siklin D1 overekpsresyonu ile tümör boyutu arasında ters korelasyon saptanmıştır. Hwang T. ve arkadaşları²¹ siklin D1’in prognoza etkisini araştırdığı çalışmada daha küçük tümör boyutu ile siklin D1 overekspresyonu arasında anlamlı ilişki saptamışlardır. Başka bir çalışmada ise diğer çalışmalardan farklı olarak siklin D1 overekspresyonu ile tümör boyutu arasında pozitif korelasyon bulunmuştur¹⁸.

T ve N evresi ile siklin D1 overekspresyonu arasında yapılan birçok çalışmada istatistiksel olarak anlamlı bir ilişki saptanmamıştır^18,19,22. Bizim çalışmamızda siklin D1 overekspresyonu ile T ve N evresi arasında literatür ile uyumlu olarak anlamlı bir ilişki saptanmamıştır.

Erken evre meme kanseri olan hastalar için en önemli prognostik gösterge lenf nodu tutulumu olup tutulan lenf nodu sayısı ile uzak metastaz riski arasında doğru-dan bir ilişki olduğu saptanmıştır²⁶. Siklin D1 overekpresyonu ile lenf nodu arasındaki ilişkiyi inceleyen çalışmaların çoğunda anlamlı bir ilişki saptanmamıştır^11,13,18,20. Bizim çalışmamızda da literatür ile uyumlu olarak siklin D1 overekspresyonu ile lenf nodu durumu arasında anlamlı bir ilişki saptanmamıştır.

Lenfovasküler invazyonun (LVI), lokal nüks ve uzak metastaz açısından prognostik öneme sahip olduğu gösterilmiştir. Rosen ve arkadaşları, meme kanseri olan hastaların 20 yıllık takiplerinde, LVI ile nüks ve ölüm riski arasında anlamlı bir ilişki olduğunu kaydetmiştir²⁶. Literatüre baktığımızda LVI ile siklin D1 ove-rekspresyonu durumunu inceleyen bir araştırmaya görülmemiştir. Çalışmamızda literatür ile uyumlu olarak bu iki parametre arasında anlamlı bir ilişki tespit edilmemiştir¹¹.

Çalışmamızda elde ettiğimiz istatistiksel anlamlılık gösteren bulgulara göre siklin D1 ekspresyonu yüksek bulunan hastalarda histolojik ve nükleer derece daha düşük bulunmuştur. Daha önce yapılan çalışmalarda da düşük histolojik dereceli tümörlerde siklin D1 overekspresyonu bildirilmiştir^11,13,17,28. Ancak Guo L. ve arkadaşlarının¹⁹ yaptığı 226 vakanın yer aldığı bir çalışmada histolojik derecenin siklin D1 overekspresyonu ile ilişkisi saptanmamıştır²¹. Çok sayıda bağımsız çalışma histolojik derecenin lenf nodu durumuna eşdeğer ve tümör boyutundan daha büyük prognostik değere sahip olduğunu göstermiştir²⁹. Ayrıca yapılan başka çalışmalarda histolojik derece, hastalıksz sağkalım ve nüks oranı ile ilişkilendirilmiştir^3,29. Bu ilişkiler, siklin D1 overekspresyonunun daha az agresif tümör özellikleri ile ilişkili olduğunu desteklemektedir. Siklin D1 overekspresyonu ve histolojik derece arasında gözlenen ters ilişki, siklin D1'in daha yüksek ekspresyonunun doğrudan veya dolaylı olarak tümör hücrelerinin diferansiyasyonu ile ilişkili olduğunu düşündürmektedir.

İnvaziv meme karsinomunda ER ve PR varlığının yapılan çalışmalarda hem prognostik hem de prediktif olduğu gösterilmiştir²⁶. Çalışmamızda siklin D1 overekspresyonu ile ER ve siklin D1 overekspresyonu ile PR arasında istatistiksel olarak anlamlı bir ilişki sap-tanmıştır. Parvin T. ve arkadaşları¹¹ 2018 yılında yayınlanan çalışmalarında hormon reseptör durumu ile siklin D1 overekspresyonu arasında anlamlı bir ilişki tespit etmişlerdir. Abd El-Maqsoud N. ve arkadaşlarıda²⁸ bu iki parametre arasında güçlü korelasyon saptamışlardır. Farklı birçok çalışmada bizim çalışmamız-da yer alan hormon durumu ile siklin D1 ilişkisi gibi benzer sonuçlar elde edilmiştir^11,13,30,31. Fakat literatürde yer alan başka çalışmalarda ER durumu ile siklin D1 arasında pozitif korelasyon bulunurken PR durumu ile ilişki saptanmamıştır^17,19. Siklin D1, güçlü bir onkogendir ve hem inhibitör hem de uyarıcı şekilde steroid hormon reseptör ailesinin birçok üyesinin aktivitesini modüle ettiği bilinmektedir³². Siklin D1’in östrojen reseptörünün bağımsız bir aktivatörü olabileceği saptanmıştır¹⁹. Ayrıca kinaz aktivitesinden bağımsız olarak, siklin D1'in, tam olarak anlaşılamayan mekanizmalar yoluyla transkripsiyonel olayları modüle ettiği gösterilmiştir³³. PR-siklin D1 komp-leksi meme karsinom hücrelerinde hücre siklusuna bağlı transkripyonu indükler. Siklin D1, PR ekspresyonunu düzenlediği ve sonuç olarak östrojen ve progesterona verilen yanıtı arttırdığı saptanmıştır^33,34. Meme tümörlerinde PR varlığı, endokrin ajanlara olası yanıtın önemli bir göstergesidir. Meme kanserinde endokrin tedavisine yanıt ER ve PR durumu ile ilişkilidir. ER-pozitif/PR-negatif meme kanserleri, seçici ER modülatör (SERM) tedavisine ER-pozitif/PR-pozitif tümörlerden daha az yanıt verir³⁵.

HER-2 overekspresyonunun kemoterapi ve endokrin tedavi yanıtında öngörücü rolü olabileceği öne sürülmüştür. Southwest Onkoloji Grubu çalışmasında HER-2 pozitif meme kanseri olan hastalarda kemoterapi tedavisinin tek başına endokrin tedaviden daha iyi sonuç verdiğini ortaya koymuştur²⁶. Parvin T. ve arkadaşları¹¹ 50 vakadan oluşan çalışmalarında siklin D1 overekspresyonu ile HER-2 durumu arasında anlamlı bir korelasyon saptamamışlardır. Bizim çalışmamızda literatür verileri ile uyumlu olarak HER-2 durumu ile siklin D1 overekspresyonu arasında anlamlı korelasyon bulunmamıştır.

Parvin T. ve arkadaşları¹¹ siklin D1 ile moleküler alt tipler ile anlamlı bir korelasyon bulmuşlardır. Bu ça-lışmaya göre luminal A tümörlerin %83.3’ü güçlü siklin D1 ekspresyonu gösterirken triple negatif tümörlerin %75’i siklin D1 negatif sonuç vermiştir. Chung J. ve arkadaşları²² ile Lengare P. ve arkadaşları³⁷ triple negatif meme kanserleriyle siklin D1 eskpresyonu arasında anlamlı bir ilişki bulmuşlar. Guo L. ve arkadaşları¹⁹ siklin D1 ekspresyonu gösteren hasta yüzdesini luminal A grubunda en yüksek saptamışlar-dır. Ortiz A. ve arkadaşlarının¹³ yaptığı çalışmada siklin D1 ekspresyonu luminal gruplarda görülürken triple negatif tümörlerde siklin D1 ekspresyon kaybı izlenmişitir. Çalışmamızda literatür ile uyumlu olarak luminal gruplarda siklin D1 ekspresyonu gösteren hasta sayısı anlamlı olarak yüksek saptanmıştır.

Guo L. ve arkadaşlarının¹⁸ 140 vakanın bulunduğu çalışmalarında siklin D1 ekspresyonu ile Ki-67 ekspresyonu arasında pozitif korelasyon saptamışlardır. Lengare P. ve arkadaşlarının³⁷ 2020 yılında yayım-lanan 50 meme karsinomu hastası ile gerçekleştirdikle-ri çalışmada Ki-67 ekspresyonu ile siklin D1 ekspres-yon kaybı arasında anlamlı bir ilişki saptanmıştır. Ortiz A. ve arkadaşları¹³ çalışmalarında siklin D1 ekspresyon kaybının yüksek Ki-67 ekspresyonu ile korele olduğu sonucuna varmışlardır. Kendi çalışmamızda ise siklin D1 ekspresyonu ile Ki-67 ekspresyonu arasında ilişki saptanmamıştır.

Medüller özellikler gösteren meme tümörlerinin belirgin bir özelliği olarak bilinen peritümöral lenfosittik yanıt, meme tümörlerinin diğer histolojik alt tiplerinde de görülebilmektedir. Yapılan çalışmalarda meme karsinomlarında artmış stromal TIL yanıtının iyi kemoterapi etkisi ve daha iyi sağkalım ile ilişkilendirmişlerdir^10,38. Yu X. ve arkadaşlarının³⁹ 12.968 meme kanseri hastası üzerinde yaptıkları meta-analizde yüksek TIL değerinin klinikopatolojik parametreler ile ilişkili olmadığını tespit etmişlerdir. Kotoula V. ve arkadaşları⁴⁰ ise 2618 tümörde stromal TIL yoğun-luğu değerlendirmişlerdir. Bu çalışmada TIL yoğunluğu ile yaş, menapoz durumu, tümör boyutu ve nodal durum ile anlamlı bir ilişki göstermemiştir. Chung Y. ve arkadaşları⁴¹ 377 invaziv meme karsinomuyla yaptıkları çalışmada yaş, T evresi, N evresi, lenfovas-küler invazyon ile TIL yoğunluğu arasında ilişki izle-memiştir. Denkert C. ve arkadaşlarının⁴² yaptığı farklı bir çalışmada TIL yoğunluğu ile yaş, tümör boyutu, histolojik alt tip (duktal/lobüler), lenf nodu duru-mu ve HER-2 durumu ile anlamlı ilişki saptanmamıştır. Mohammed Z. ve arkadaşları⁴³ ise TIL ile yaş, tümör boyutu, lenf nodu sayısı, HER-2 durumunu ilişkilendirmemişlerdir. Bizim çalışmamızda literatür ile benzer sonuçlar gözlenmiştir. Çalışmamızda TIL yüzdesi ile yaş, tümör boyutu, T evresi, N evresi, lenf nodu durumu, histolojik alt tip (duktal/lobüler), LVI, HER-2 durumu ile anlamlı ilişki saptanmamıştır.

Mohammed Z. ve arkadaşlarının⁴³ yaptığı çalışmada ER ve PR durumu ile TIL arasında ters korelasyon saptanmıştır. Denkert C. ve arkadaşları da⁴² TIL varlığı ile negatif hormon reseptör durumunu anlamlı ilişki bulmuşlardır. Huszno J. ve arkadaşları da ⁴⁴ 76 erken evre meme kanseri hastasında yaptıkları çalışma-da ER ve PR negatifliği ile artmış TIL yoğunluğunu ilişkilendirmişlerdir. Çalışmamızda literatür ile uyumlu olarak PR negatif olan meme tümörlerinde daha yüksek TIL oranları saptanmıştır. Fakat ER durumu ile TIL arasında literatür ile zıt olarak anlamlı bir ilişki sap-tanmamıştır. Literatürde yapılan farklı bir çok çalışmada TIL yoğunluğu histolojik derece ile pozitif korelasyon göstermiştir^38,40,41,43. Denkert C. ve arkadaşlarının⁴² yaptığı 840 invaziv meme karsinomu ile gerçekleştirilen çalışmada TIL ile histolojik derece arasında anlamlı ilişki saptamışlardır. Huszno J. ve arkadaşları⁴⁴ ise yaptıkları çalışmada yüksek histolojik dereceli tümörlerde yüksek TIL değerlerini anlamlı olmayan şekilde düşük dereceli tümörlere göre daha sık tespit etmişlerdir. Kendi çalışmamızda litera-tür ile uyumlu olarak histolojik derece ile TIL arasında pozitif korelasyon bulunmuştur. Çalışmamızda nükleer derece ile TIL arasında istatistiksel olarak anlamlı bir ilişki saptanmıştır. Nükleer derecesi yüksek olan tümörlerde TIL yüzdeleri de yüksek izlenmiştir. Literatür tarandığında nükleer derece ile TIL arasındaki ilişkinin incelendiği çalışmaya rastlanmamıştır.

Chung Y. ve arkadaşlarının⁴¹ yaptığı çalışmada TIL ile Ki-67 durumu arasında pozitif korelasyon saptamışlardır. Kotoula V. ve arkadaşlarının⁴⁰ yaptığı çalışmada yüksek TIL oranlarına sahip tümörler istatistiksel olarak anlamlı şekilde daha yüksek Ki-67 seviyelerinde bulunmuştur. Gao Z. ve arkadaşlarının³⁸ 2020’de yayımlanan meta-analizlerinde TIL ile Ki-67 durumu arasında pozitif korelasyon tespit edilmiştir. Bizim çalışmamızda literatürden farklı olarak Ki-67 durumu ile TIL yüzdesi arasında anlamlı bir ilişki saptanmamıştır.

Loi S. ve arkadaşlarının⁴⁵ 2.009 meme kanseri has-tası ile gerçekleştirdikleri çalışmada ER-negatif/PR- negatif ve HER2-pozitif meme karsinomu moleküler alt gruplarında TIL seviyeleri, ER-pozitif/HER2- negatif alt gruplarına kıyasla anlamlı şekilde daha yüksek bulunmuştur. Literatürde yer alan farklı çalışmalara göre triple negatif ve HER2 pozitif tümörlerde TIL seviyeleri yüksek tespit edilmiştir^46,47. Bizim çalışmamızda triple negatif tümörlerin TIL oranı %30, HER2 pozitif grubu tümörlerin %23.75, luminal A ve B alt grubundaki tümörlerin sırasıyla %16 ve %20 olarak izlenmiştir. Triple negatif ve HER2 pozitif me-me karsinomu alt tiplerinde anlamlı olmayan şekilde TIL oranları literatür ile uyumlu olarak yüksek saptanmıştır.

Mohammed Z. ve arkadaşları⁴⁸ TIL oranları ile lenfovasküler invazyon arasında istatistiksek olarak anlamlı bir ilişki bulmuşlardır. Mahmoud S. ve arkadaşlarının⁴⁹ 1.334 meme kanseri hastasında CD+8 T lenfositlerin prognostik değerini araştırdıkları çalışma-da CD+8 T lenfosit oranı ile lenfovasküler invazyon arasında anlamlı bir korelasyon saptamamışlardır. Bizim çalışmamızda TIL yüzdesi ile LVİ varlığı arasında anlamlı bir ilişki saptanmamıştır.

Çalışmamızda siklin D1 ekspresyonu ile TIL oranları arasındaki ilişki değerlendirilmiştir. Siklin D1 ekspresyonu göstermeyen grubun TIL yüzdesi (%38) anlamlı olmayan şekilde siklin D1’i %50’den fazla eksprese eden grubun TIL yüzdesinden (%18.5) yüksek saptan-mıştır. Siklin D1 overekspresyonu gösteren meme kanserleri, düşük dereceli ve iyi farklılaşmış tümörlerdir, daha iyi prognozla ilişkilendirilmiştir¹¹. Stromal lenfositler ise çoğu meme kanserinde bulunur. Hormon reseptör pozitif meme kanseri ile karşılaştırıldığında triple negatif meme kanserlerinde daha fazla gözlenmiştir. Bu bilgiler birlikte değerlendirildiğinde çalışmamızdaki siklin D1 ve TIL verileri uyumlu izlendi. Yapılan çalışmalarda daha fazla TIL barındıran triple negatif ve HER2 pozitif meme kanseri hastalarının daha iyi sağ kalıma sahip olduğu tespit edilmiştir (10, 50). Okcu ve arkadaşları tüm luminal gruplarda TIL ve prognostik parametrelerin ilişkisini araştırdıkları çalışmalarında yüksek TIL varlığında hastaların sağkalımında belirgin iyileşme görmüşlerdir ⁵¹. Güncel birçok immünmodulatör hedefli tedavilerin hasta seçiminde TIL’i bir parametre olarak kullanılmasını savunan çok sayıda çalışma mevcuttur⁵².

Retrospektif olması ve nispeten az sayıda olgu içermesi çalışmamızın kısıtlılıklarını oluşturmaktadır. Ancak literatürde siklin D1 ile TIL arasındaki ilişkiyi inceleyen bir araştırmanın olmaması bizim çalışmamızı diğer çalışmalardan farklı kılmaktadır. Biz çalışmamızda siklin D1 ile TIL arasında anlamlı istatiksel ilişki saptamadık. Bu iki parametre arasındaki ilişkiyi tam olarak anlayabilmek için daha ayrıntılı ve geniş serilerde çalışmalara ihtiyaç vardır.

Sonuç olarak Siklin D-1 ekspresyonu kötü prognostik parametre olarak kullanılabilecek bir immün belirteçtir. Güncel çalışmaların ışığında TIL yeni nesil immünoterapiler açısından hasta yönetiminde önem kazanmıştır, bu nedenle çalışmamızda TIL ile ilişkili bir marker bulabilmek amacıyla Siklin D-1 ekspresyonu ve TIL arasındaki ilişki araştırılmıştır. TIL ve Siklin D-1 ekspresyonu arasında anlamlı ilişki saptanmasa da, sonuçlarımız literatüre sağlayacağı birikim ve yeni çalışmalara kaynak oluşturma açısından önemlidir.

1) Bray F, Ferlay J, Soerjomataram I, Siegel RL, Torre LA, Jemal A. Global cancer statistics 2018: GLOBOCAN estimates of incidence and mortality worldwide for 36 cancers in 185 countries. CA Cancer J Clin 2018; 68: 394-24.

2) Siegel RL, Miller KD, Jemal A. Cancer statistics, 2020. CA Cancer J Clin. 2020; 70: 7-30.

3) Rakha EA, El-Sayed ME, Lee AHS et al. Prognostic significance of nottingham histologic grade in invasive breast carcinoma. J Clin Oncol 2008; 26: 3153-58.

4) Frank GA, Danilova N V, Andreeva YY, Nefedova NA. WHO Classification of tumors of the breast, 2012. Arkh Patol 2013; 75: 53-63.

5) Esbah O, Oksuzoglu B. Prognostic & predictive factors for planning adjuvant chemotherapy of early-stage breast cancer. Indian J Med Res 2017;146: 563-71.

6) Fisher ER, Land SR, Fisher B, Mamounas E, Gilarski L, Wolmark N.Pathologic findings from the National Surgical Adjuvant Breast and Bowel Project. Cancer 2004; 100: 238-44.

7) Agahozo MC, Hammerl D, Debets R, Kok M, van Deurzen CHM. Tumor-infiltrating lymphocytes and ductal carcinoma in situ of the breast: friends or foes? Mod Pathol 2018; 31: 1012-25.

8) Gatti-Mays ME, Balko JM, Gameiro SR et al. If we build it they will come: targeting the immune response to breast cancer. npj Breast Cancer 2019; 5: 37.

9) Salgado R, Denkert C, Demaria S, et al. International TILs Working Group 2014. The evaluation of tumor-infiltrating lymphocytes (TILs) in breast cancer: recommendations by an International TILs Working Group 2014. Ann Oncol 2015; 26 :259-71.

10) Gao G, Wang Z, Qu X, Zhang Z. Prognostic value of tumor-infiltrating lymphocytes in patients with triple-negative breast cancer: a systematic review and meta-analysis. BMC Cancer 2020; 20: 179.

11) Parvin T, Das C, Choudhury M, Chattopadhyay BK, Mukhopadhyay M. Prognostic Utility of Cyclin D1 in Invasive Breast Carcinoma. Indian J Surg Oncol 2019; 10:167-73.

12) Lamb R, Lehn S, Rogerson L, Clarke RB, Landberg G. Cell cycle regulators cyclin D1 and CDK4/6 have estrogen receptor-dependent divergent functions in breast cancer migration and stem cell-like activity. Cell Cycle 2013; 12: 2384-94.

13) Ortiz AB, Garcia D, Vicente Y, Palka M, Bellas C, Martin P. Prognostic significance of cyclin D1 protein expression and gene amplification in invasive breast carcinoma. PLoS One 2017;12: e0188068.

14) Borgen PI, Wong GY, Vlamis V, et al. Current management of male breast cancer. A review of 104 cases. Ann Surg 1992; 215: 451-7.

15) Azim HA Jr, Partridge AH. Biology of breast cancer in young women. Breast Cancer Res 2014; 16: 427.

16) Noone AM, Cronin KA, Altekruse SF et al. Cancer Incidence and Survival Trends by Subtype Using Data from the Surveillance Epidemiology and End Results Program, 1992-2013. Cancer Epidemiol Biomarkers Prev 2017; 26: 632-41.

17) Bilalović N, Vranić S, Bašić H, Tatarević A, Selak I. Immunohistochemical evaluation of cyclin D1 in breast cancer. Croat Med J 2005; 46: 382-8.

18) Guo LL, Gao P, Wu YG et al. Alteration of Cyclin D1 in Chinese Patients with Breast Carcinoma and its Correlation with Ki-67, pRb, and p53. Arch Med Res 2007; 38: 846-52.

19) Guo L, Liu S, Jakulin A, Yilamu D, Wang B, Yan J. Positive expression of cyclin D1 is an indicator for the evaluation of the prognosis of breast cancer. Int J Clin Exp Med 2015; 8: 18656-64.

20) Hadzisejdić I, Mustać E, Jonjić N, Petković M, Grahovac B. Nuclear EGFR in ductal invasive breast cancer: correlation with cyclin-D1 and prognosis. Mod Pathol 2010; 23: 392-403.

21) Hwang TS, Han HS, Hong YC, Lee HJ, Paik NS. Prognostic value of combined analysis of cyclin D1 and estrogen receptor status in breast cancer patients. Pathol Int 2003; 53: 74-80.

22) Chung J, Noh H, Park KH, Choi E, Han A. Longer Survival in Patients with Breast Cancer with Cyclin D1 Over-Expression after Tumor Recurrence: Longer, but Occupied with Disease. J Breast Cancer 2014; 17: 47.

23) Peurala E, Koivunen P, Haapasaari KM, Bloigu R, Jukkola-Vuorinen A. The prognostic significance and value of cyclin D1, CDK4 and p16 in human breast cancer. Breast Cancer Res 2013; 15: R5.

24) Siraj AK, Kumar Parvathareddy S, Annaiyappanaidu P, et al. High Expression of Cyclin D1 is an Independent Marker for Favorable Prognosis in Middle Eastern Breast Cancer. Onco Targets Ther 2021; 14: 3309-18.

25) Ahlin C, Lundgren C, Embretsén-Varro E, Jirström K, Blomqvist C, Fjällskog M-L. High expression of cyclin D1 is associated to high proliferation rate and increased risk of mortality in women with ER-positive but not in ER-negative breast cancers. Breast Cancer Res Treat 2017; 164: 667.

26) Cianfrocca M, Goldstein LJ. Prognostic and predictive factors in early-stage breast cancer. Oncologist 2004; 9: 606-16.

27) Lee A, Chan Park W, Yim HW, Lee MA, Park G, Lee KY. Expression of c-erbB2, cyclin D1 and Estrogen Receptor and their Clinical Implications in the Invasive Ductal Carcinoma of the Breast. Jpn J Clin Oncol 2007; 37: 708-14.

28) Abd El-Maqsoud NMR, Aly MM. Significance of cyclin Dl overexpression and amplification in ductal hyperplasia, carcinoma in situ and invasive carcinoma in Egyptian female breast. Int J Cancer Res 2010; 6: 202-19.

29) Rakha EA, Reis-Filho JS, Baehner F et al. Breast Cancer Prognostic Classifi Cation in the Molecular Era: The Role of Histological Grade. Breast Cancer Res 2010; 12: 207.

30) Umekita Y, Ohi Y, Sagara Y, Yoshida H. Overexpression of cyclinD1 predicts for poor prognosis in estrogen receptor-negative breast cancer patients. Int J Cancer 2002; 98: 415-8.

31) Frierson HF Jr, Gaffey MJ, Zukerberg LR, Arnold A, Williams ME. Immunohistochemical detection and gene amplification of cyclin D1 in mammary infiltrating ductal carcinoma. Mod Pathol 1996 ;9: 725-30.

32) Arnold A, Papanikolaou A. Cyclin D1 in breast cancer pathogenesis. J Clin Oncol 2005; 23: 4215-24.

33) Yang C, Chen L, Li C, Lynch MC, Brisken C, Schmidt EV. Cyclin D1 enhances the response to estrogen and progesterone by regulating progesterone receptor expression. Mol Cell Biol 2010; 30: 3111-25.

34) Dressing GE, Knutson TP, Schiewer MJ et al. Progesterone Receptor-Cyclin D1 Complexes Induce Cell Cycle-Dependent Transcriptional Programs in Breast Cancer Cells. Mol Endocrinol 2014; 28: 442.

35) Cui X, Schiff R, Arpino G, Osborne CK, Lee A V. Biology of progesterone receptor loss in breast cancer and its implications for endocrine therapy. J Clin Oncol 2005; 23: 7721-35.

36) Mohammadizadeh F, Hani M, Ranaee M, Bagheri M. Role of cyclin D1 in breast carcinoma. J Res Med Sci 2013; 18: 1021.

37) Bowe DB, Kenney NJ, Adereth Y, Maroulakou IG. Suppression of Neu-induced mammary tumor growth in cyclin D1 deficient mice is compensated for by cyclin E. Oncogene 2002; 21: 291-8.

38) Lengare PV, Sinai Khandeparkar SG, Joshi AR, Gogate BP, Solanke SG, Gore SH. Immunohistochemical expression of cyclin D1 in invasive breast carcinoma and its correlation with clinicopathological parameters. Indian J Pathol Microbiol 2020; 63: 376-81.

39) Gao Z, Li C, Liu M, Jiang J. Predictive and prognostic role of tumour-infiltrating lymphocytes in breast cancer patients with different molecular subtypes: a meta-analysis. BMC Cancer 2020; 20: 1150.

40) Yu X, Zhang Z, Wang Z, Wu P, Qiu F, Huang J. Prognostic and predictive value of tumor-infiltrating lymphocytes in breast cancer: a systematic review and meta-analysis. Clin Transl Oncol 2016; 18: 497.

41) Kotoula V, Chatzopoulos K, Lakis S et al. Tumors with high-density tumor infiltrating lymphocytes constitute a favorable entity in breast cancer: a pooled analysis of four prospective adjuvant trials. Oncotarget 2016; 7: 5074.

42) Chung YR, Kim HJ, Jang MH, Park SY. Prognostic value of tumor infiltrating lymphocyte subsets in breast cancer depends on hormone receptor status. Breast Cancer Res Treat 2017; 161: 409-20.

43) Denkert C, Loibl S, Noske A et al. Tumor-Associated Lymphocytes As an Independent Predictor of Response to Neoadjuvant Chemotherapy in Breast Cancer 2009; 28: 105-13.

44) Mohammed ZM, Going JJ, Edwards J, Elsberger B, Doughty JC, McMillan DC. The relationship between components of tumour inflammatory cell infiltrate and clinicopathological factors and survival in patients with primary operable invasive ductal breast cancer. Br J Cancer 2012; 107: 864.

45) Huszno J, Nożyńska EZ, Lange D, Kołosza Z, Nowara E. The association of tumor lymphocyte infiltration with clinicopathological factors and survival in breast cancer. Polish J Pathol 2017; 68: 26-32.

46) Loi S, Sirtaine N, Piette F et al. Prognostic and predictive value of tumor-infiltrating lymphocytes in a phase III randomized adjuvant breast cancer trial in node-positive breast cancer comparing the addition of docetaxel to doxorubicin with doxorubicin-based chemotherapy: BIG 02-98. J Clin Oncol 2013; 31: 860-7.

47) Savas P, Salgado R, Denkert C, et al. Clinical relevance of host immunity in breast cancer: from TILs to the clinic. Nat Rev Clin Oncol 2015; 13: 228-41.

48) Yamaguchi R, Tanaka M, Yano A et al. Tumor-infiltrating lymphocytes are important pathologic predictors for neoadjuvant chemotherapy in patients with breast cancer. Hum Pathol 2012; 43: 1688-94. .

49) Mohammed ZM, Going JJ, Edwards J, Elsberger B, Doughty JC, McMillan DC. The relationship between components of tumour inflammatory cell infiltrate and clinicopathological factors and survival in patients with primary operable invasive ductal breast cancer. Br J Cancer 2012; 107: 864-73.

50) Mahmoud SMA, Paish EC, Powe DG, et al. Tumor-Infiltrating CD8+ Lymphocytes Predict Clinical Outcome in Breast Cancer. J Clin Oncol 2011; 29: 1949-55.

51) Lee H, Kim YA, Kim Y et al. Clinicopathological factors associated with tumor-infiltrating lymphocyte reactivity in breast cancer. Cancer Immunol Immunother 2020; 69: 2381-91.

52) Okcu O, Öztürk SD, Öztürk Ç, Şen B, Yasin Aİ, Bedir R. Tumor-infiltrating lymphocytes (TILs)/volume and prognosis: The value of TILs for survival in HER2 and TN breast cancer patients treated with chemotherapy. Ann Diagn Patho. 2022; 58: 151930.

53) Lam BM, Verrill C. Clinical Significance of Tumour-Infiltrating B Lymphocytes (TIL-Bs) in Breast Cancer: A Systematic Literature Review. Cancers (Basel) 2023; 15: 1164.